التحقق من تأثير تعقيم الأوتوكلاف

المعرفة التقنية 2019-04-04 10:06:36
يقوم معقم البخار ذو الضغط العالي بتعقيم المواد لتحقيق متطلبات العقم ، وهو الضمان الأساسي للتجارب الميكروبية. إن تأهيل جهاز التعقيم بالأوتوكلاف هو أول خطوة أساسية وحاسمة في نجاح التجربة. باستثناء كمية صغيرة من الوسط ، والتي تحتاج فقط إلى تسخينها وحلها ، وليس هناك حاجة إلى تعقيم ، يتم تعقيم معظم الوسط عند 121 درجة مئوية لمدة 15-30 دقيقة. على وجه الخصوص ، تعقيم وسيط الاختبار المعقم غير شامل ويرتبط بشكل مباشر بنتائج اختبار العقم على العينة. لذلك ، يجب التحقق من تأثير التعقيم للأوتوكلاف. تحقيقا لهذه الغاية ، نحن نقدم طريقة بسيطة ومجدية للتحقق من فعالية التعقيم.

1. اختبار المواد

(1) Bacillus stearothermophilus paper (تتوفر أيضًا مجموعة من أنابيب الاختبار من قبل شركة 3M). العصوية stearothermophilus.

ATCC7053 هي بكتيريا مؤشر بيولوجي تستخدم عادة في هذه الطريقة ، وتحتوي على 5 خلايا CFU / قرص.

(2) 121 درجة مئوية بطاقة مؤشر التعقيم بالضغط الكيميائي (شريط مؤشر التعقيم المشترك هو متاح أيضا).

(3) تم تعقيم المتوسطة المائية للبروموكيسول فرفرية عند درجة حرارة 116 مئوية لمدة 20 دقيقة ثم استخدامها (مثل أنبوب الاختبار المباع من قبل شركة 3M ، قد لا يتم استخدام هذا الوسيط).

(4) O-150 درجة مئوية ميزان الحرارة المتبقية (المعايرة المطلوبة من قبل مكتب القياس).

2. الطريقة والنتيجة

وضعت ورقة Bacillus stearothermophilus (يشار إليها فيما يلي باسم القرص البكتيري) في أنبوب اختبار مختوم مع ملقط معقم. يتم وضع بطاقة المؤشر الكيميائي ومقياس الحرارة الموضعي في أنبوب اختبار مفتوح. تحضير 5-10 أجزاء من كل من أنابيب اثنين أعلاه. ضعها في منفذ بخار الأوتوكلاف ، ومنفذ العادم السفلي ومخرج المياه السفلية أو في منتصف الجزء العلوي والسفلي واليسار واليمين. إذا كان جهاز التعقيم في الطابق الثاني ، فيجب وضع 10 أماكن.

يمكن استخدام ميزان الحرارة المتبقي لاختبار التحقق بعد توحيده. قبل الاختبار ، يجب تحطيم عمود الزئبق في مقياس الحرارة إلى أقل من 40 درجة مئوية. يجب أن يكون الفرق في درجة حرارة مقياس الحرارة بعد كل مراقبة بين 1 درجة مئوية ، مما يشير إلى أن توزيع درجة الحرارة داخل جهاز التعقيم موحد.

يجب استزراع البلاك المعقم عند 56-60 درجة مئوية لمدة 24-48 ساعة في ظل ظروف معقمة معقمة تحت وسيط برومينيسول برومينيسول معقم لملاحظة تغير اللون. إذا تحوّل الوسط إلى اللون الأصفر ، فلن يُعطل B. stearothermophilus الموجود في الجهاز اللوحي تمامًا ، ولا تزال البكتيريا تنمو في الوسط ، ويتحلل الجلوكوز لإنتاج حمض إلى أصفر. إذا لم يتغير لون الوسط ، فإنه لا يزال أرجوانيًا ، مما يشير إلى أن الجراثيم قد تم تعطيلها. في الوقت نفسه ، تم وضع الورق غير المصلب في الوسط كعنصر تحكم إيجابي ، وتم استخدام وسيط فارغ بدون ورق كعنصر تحكم سلبي.

يتغير لون المؤشر على بطاقة المؤشر الكيميائي من الأصفر الفاتح إلى الأسود أثناء التعقيم. مع تغير اللون في العمق ، ومقارنة مع لون التحكم ، يمكن الحكم على ما إذا كان تأثير التعقيم يلبي المتطلبات. يجب تخزين بطاقة المؤشر الكيميائي في مكان جاف. سوف يتغير لونه عند تعرضه للرطوبة ، مما سيؤثر على ملاحظة تأثير التعقيم.

يجب أن يسمح التعقيم بالضغط العالي بالبخار بدخول المعقم بسلاسة ، والاتصال بالعناصر المعقمة ، وتفريغ الهواء البارد الأصلي لتحقيق تأثير التعقيم. يجب إجراء توزيع الحرارة بدون تحميل والتحقق من الاختراق الحراري الكامل (ليس أكثر من ثلثي الحجم الكلي عند التحميل الكامل). تكرر التحققان ثلاث مرات ليصبح المجموع ست مرات.

أظهرت خمس نقاط وستة اختبارات أن درجة الحرارة كانت عند 121 درجة مئوية ، تحولت بطاقة المؤشر الكيميائي إلى اللون الأسود ؛ وكانت درجة الحرارة متسقة مع لون التحكم ؛ ولم يتغير الوسط لونه ، مما يشير إلى أن تأثير التعقيم بالبخار ذي الضغط العالي مؤهل.

أجهزة التعقيم هي أدوات قوية ، لكن عمليات التفتيش القوية ليست سوى فحص للمعايير المادية للأداة. لذلك ، يجب أن يتحقق معقم التعقيم من تأثير التعقيم. غالبًا ما تتجاهل بعض الوحدات هذه القضية المهمة. في أجهزة التعقيم المحمولة المحلية ، يصل مؤشر الأداة غالبًا إلى درجة الحرارة المطلوبة ، لكن درجة الحرارة الفعلية للمادة المعقمة لا تفي بالمتطلبات. يؤدي إلى تعقيم العناصر ليست شاملة ، مما يؤثر على نتائج التجربة. لا يتم تعقيم الوسيط جيدًا ، مما يؤثر على استخدام الوسيط والحكم على النتائج. لذلك ، فإن التحقق من التأثير العقيم للأوتوكلاف هو مشكلة يجب أن تؤخذ على محمل الجد.

عند استخدام جهاز التعقيم بالضغط العالي ، احرص أولاً على إزالة الهواء البارد من جهاز التعقيم أثناء فتح البخار. يجب إغلاق فتحة التهوية قبل إزالة كل الهواء البارد في الوحدة.

إذا بقي بعض الهواء في جهاز التعقيم ، فقد وصل مقياس الضغط إلى قيمة ضغط معينة ، لكن درجة الحرارة داخل الجهاز لم تصل إلى الدرجة المقابلة. كلما زاد الهواء المتبقي ، زاد الفرق بين الاثنين ، ودرجة الحرارة داخل الجهاز غير كافية ، ولم يكتمل التعقيم. (سيكون لدى العديد من الناس فقاعات في القسطرة الصغيرة عندما يتم تعقيمها في وسط التخمير. قد يكون من الممكن أيضًا محاولة تفريغ مزيد من الهواء البارد من جهاز التعقيم. له تأثير معجزي).

الكلمات الصين الأوتوكلاف ، الصين معقم البخار ، الأوتوكلاف الفوق ، التعقيم بالبخار العمودي ، الأوتوكلاف العمودي ، معقم البخار الأفق