تخليق وانقسام بولي ببتيد المرحلة الصلبة

المعرفة التقنية 2022-07-06 18:06:22
Polypeptide هو مادة كيميائية تتكون من الأحماض الأمينية ، الموجودة في كل مكان في الكائنات الحية. حتى الآن ، تم العثور على عشرات الآلاف من polypeptides في الكائنات الحية ، ولها نشاط بيولوجي واسع النطاق وأمان جيد.

1.jpg

الشكل 1 الشكل التخطيطي المرحلة الصلبة عديد الببتيد التخطيطي


في عام 1963 ، اقترح ميريفيلد طريقة تصنيع الببتيد ذات المرحلة الصلبة ، والتي فتحت مساحة واسعة لأبحاث الببتيد وعززت بشكل كبير تطوير البيولوجيا الجزيئية ومجالات أخرى. لهذا السبب ، حصل ميريفيلد على جائزة نوبل في الكيمياء عام 1984.

منذ التسعينيات ، مع النضج التدريجي لتقنية تخليق البولي ببتيد ، تم تطوير المزيد والمزيد من البولي ببتيدات النشطة وتطبيقها على نطاق واسع في مجالات الطب والأغذية ومستحضرات التجميل والزراعة وتربية الحيوانات وما إلى ذلك. كما تم استخدام طريقة تخليق متعدد الببتيد في المرحلة الصلبة على نطاق واسع. في هذا البحث ، يتم تقديم تخليق الطور الصلب وانقسام الببتيدات وفقًا لمفاعل تصنيع الببتيد ذو المرحلة الصلبة.

2.jpg

الشكل 2 الشكل 2 التطبيق الميداني الكامل لمفاعل التوليف متعدد الببتيد المرحلة الصلبة


أولا: تكسير الراتنج


أنا. تغذية

إضافة الراتينج إلى مرحلة صلبة توليف ، إضافة DCM للتورم ، التصريف ، إضافة DMF للغسيل ، بعد الغسيل ، استنزاف من أجل الاستعداد.

ثانيا. تركيز

إذابة الحمض الأميني في حجم معين من DMF ، وإضافة عامل تكثيف للتنشيط ، ووضعه في مركب المرحلة الصلبة ، وتكميل DMF لتركيز التفاعل ، والتحريك للتفاعل.

ثالثا. إزالة مجموعة الحماية تم الكشف عن درجة التفاعل بكاشف كايزر. بعد اكتمال التفاعل ، تم ضخ المذيب ، متبوعًا بغسيل DMF. تمت إضافة محلول PIP / DMF لإزالة المجموعة الواقية. تم الكشف عن درجة التفاعل باستخدام كاشف كايزر. بعد اكتمال التفاعل ، تم ضخ المذيب ، متبوعًا بغسيل DMF ، حيث تمت إضافة الحمض الأميني التالي.

رابعا. دورة التكثيف

ربط الأحماض الأمينية بالتتابع وفقًا لتسلسل الراتنج ، وإجراء عملية دورة التكثيف وفقًا لخطوات "إزالة الحماية - الغسيل - تنشيط الأحماض الأمينية - غسل التكثيف - تغذية التكثيف" ، وإكمال تكثيف n الأحماض الأمينية المتبقية وفقًا لتسلسل الأحماض الأمينية .

أنا. التفريغ

بعد التوليف ، تم غسل الراتينج عبر IPA و DCM لإكمال تقلص الراتنج وتفريغه في صينية الفولاذ المقاوم للصدأ.

ثانيا. تجفيف الراتنج

تجفيف الراتنج في فرن تجفيف تفريغ الهواء في درجة حرارة الغرفة ، ووزنه بعد التجفيف ، وحساب المحصول.

ثالثا. استعادة سوائل النفايات العضوية ، معالجة مركزية.

رابعا. المقاصة

يجب على المشغل مسح الموقع في الوقت المناسب بعد العملية.

أولا: تكسير الراتنج

أنا. تحضير سائل

قم بإعداد محلول التحلل هذا وفقًا للنسبة المكونة لمحلول التحلل ، ثم ضع محلول التحلل في الثلاجة للتخزين البارد مسبقًا.

ثانيا. تغذية

إضافة راتنج الببتيد إلى غلاية التفاعل ، وإضافة سائل تكسير مبرد مسبقًا ، والتحريك من أجل التفاعل.

ثالثا. التفريغ

تفريغ محلول التفاعل هذا بعد التكسير ، والترشيح لإزالة الراتنج ، والغسيل باستخدام TFA.

رابعا. تركيز

انقل هذا السائل المتشقق إلى مبخر دوار للتركيز إلى حجم صغير في درجة حرارة الغرفة.

v. هطول الأمطار

يُسكب محلول التفاعل المركز في ميثيل ثلاثي البيوتيل إيثر مبرد مسبقًا (يُشار إليه اختصارًا باسم الأثير) ويقلب لترسيب كمية كبيرة من المواد الصلبة.

السادس. الطرد المركزي

يتم طرد السائل العكر بالطرد المركزي وغسله باستخدام الأثير المبرد مسبقًا.

أنا. تجفيف الببتيد الخام

تم نقل الببتيد الخام المنقى إلى فرن تجفيف بالتفريغ للتجفيف عند درجة حرارة الغرفة.

ثانيا. استعادة سوائل النفايات العضوية ، معالجة مركزية.

ثالثا. المقاصة

يجب على المشغل مسح الموقع في الوقت المناسب بعد العملية.

3.jpg

الشكل 3 مجموعة كاملة غلاية الانقسام متعدد الببتيد المرحلة الصلبة


في عملية الإنتاج الفعلية ، يحتاج الببتيد الخام المتصدع أيضًا إلى الخضوع لعمليات مثل التنقية والتركيز والترشيح والتجفيف بالتجميد ، والتي لن يتم وصفها بالتفصيل في هذه الورقة.

في الوقت الحاضر ، تكون عملية تخليق سلاسل الببتيد الأقصر ناضجة نسبيًا ، بينما بالنسبة للمواد البروتينية ذات الكتلة الجزيئية الأكبر وسلاسل الببتيد الأطول ، فإن تقنية تخليق المرحلة الصلبة لها قيود معينة ، وفي الوقت نفسه ، هناك مشاكل مثل التكلفة العالية و مصحوبة بردود فعل جانبية. لذلك ، بناءً على تخليق المرحلة الصلبة من الببتيدات ، لا يزال يتعين إيجاد طرق جديدة.

الكلمات مفاعل التبلور ، مفاعل المرحلة الصلبة ، مفاعل الترشيح ، مفاعل تصنيع الببتيد ذو المرحلة الصلبة